La segunda temporada empezó a emitirse en los EE. UU. el 4 de octubre de 2007, y se compone de 15 episodios. La segunda temporada fue en principio preconcebida con 22 episodios pero fue finalmente de 15 debido a la huelga de guionistas del 2007-2008. El episodio final se emitió el 8 de mayo de 2008. Después de que Liz rompiera con Floyd en el verano, empezó a buscar formas de superarlo. Cuando Jerry Seinfeld se enfrenta a Jack por una nueva campaña de marketing que incluye imágenes de la serie de televisión Seinfeld, en todos los programas de la NBC, tiene un encuentro fortuito con Liz y le da unos consejos muy valiosos. Durante la pausa de verano de TGS, Jenna consigue algo de sobrepeso debido a que actúa en una obra de Broadway Mystyc Pizza: The Musical — basado en la película real Mystic Pizza. Tracy tiene algunos problemas maritales con su esposa Angie Jordan — Sherri Shepherd — y se separan, para luego volverse a emparejar.

Durante la temporada, Jack desarrolla una relación con una congresista del Partido Demócrata de los Estados Unidos de los EE. UU., C.C. Cunnigham — interpretada por Edie Falco. Más tarde rompen. Una de las tramas que fue establecida en la primera temporada pero que se vuelve más visible en la segunda es la que ve a Jack postulando por el gobierno de GE contra su archinémesis Devon Banks — Will Arnett. La temporada termina con Liz planeando adoptar un hijo después de creer que estaba embarazada de Dennis. Kenneth viaja a Pekín para ser paje en los Juegos Olímpicos de Pekín 2008 y Tracy crea un videojuego pornográfico. Jack termina la temporada trabajando para el gobierno en Washington D.C., pero planea ser despedido proponiendo una «bomba gay».