祖儿同柏芝自赢了大赛后因争仔而决裂，水晶晶领队杨生邀请柏芝及冬阴功加入有3T及军婆坐镇的水晶晶。柏芝加入后与军婆组成Twins，大杀四方，更连挫祖儿的水蜜蜜。祖儿与队长伊健为救球队，决定千里昭昭邀请正在巡回演出的隆婆归队。后来，村长决定派水晶晶队代表清迈出赛，杨生决定加入新血，放逐柏芝与冬阴功。柏芝与祖儿言归于好，回归水蜜蜜，迎战水晶晶，结果……

祖兒（葛民輝配音）同柏芝（黃偉文配音）自贏了大賽後因出風頭問題而決裂，柏芝及冬、陰、功（張學潤配音）獲得楊生（鄭中基配音）邀請而過檔水蜜蜜的翻版水晶晶，更使水蜜蜜連番受挫。祖兒及隊長伊健 （鄭伊健配音）為救球隊，決定到中國南部的大羅邀請正在巡迴演出的隆婆（吳君如配音）歸隊。遠赴大羅期間，祖兒亦憶起大學期間與柏芝、隆婆、貞子（谷德昭配音）、華仔、千嬅（楊千嬅配音）與種種生活往事。

整部《人妖打排球2》可粗略分為“前傳”及“後傳”兩部份，“前傳”主要補充首集沒有交待的前事，“後傳”則講述水蜜蜜隊員在上次勝出大賽後發生的事情，包括內訌、連番挫敗等。

祖兒同柏芝自贏了大賽後因爭仔而決裂，柏芝及冬、陰、功又因為水晶晶隊的領隊楊生一句說話，加入有3T及軍婆坐鎮的水晶晶隊，當柏芝加入後，便與軍婆組成Twins，連番挫敗祖兒的水蜜蜜；祖兒及隊長伊健為救球隊，決定千里昭昭到中國南部邀請正在巡迴演出的隆婆歸隊． 後來，村長決定派水晶晶隊代表清邁縣出賽，楊生決定加入新血。楊生話棒得柏芝與軍婆做Twins，柏芝與祖兒亦言好，與冬、陰、功一同回歸水蜜蜜隊，迎戰水晶晶隊，展開一輪龍爭虎鬥…

A volleyball team made up of individuals, who are homosexual, face several challenges as fame gets in the way of their bond coupled with their other differences.

หลังจากที่ทีมประสบความสำเร็จ ในการครองแชมป์กีฬาแห่งชาติเมื่อปี (ภาค) ที่แล้ว ก็เกิดการแตกแยกกันของทีม โดยที่ โหน่ง, เอพริล, เมย์, จูน ได้แยกตัวออกไปสร้างทีมวอลเล่ย์บอลกะเทย และมี หน่อง กะเทยน้องใหม่ มาเป็นคู่หูคนใหม่ของโหน่ง ภายใต้สังกัดของสโมสร โดยมี อากู๋ เป็นผู้ดูแลทีม เพราะข้อเสนอและผลประโยชน์ทางธุรกิจต่างๆ ทำให้ทีมของโหน่งเติบโต และประสบความสำเร็จอย่างรวดเร็ว ในขณะที่ทีมสตรีเหล็กเดิมที่เหลือ จุง, มล และ ชัย ยังคงเล่นวอลเล่ย์บอลต่อไปทั้ง จนกระทั่งสองทีมได้มาเจอกันอีกครั้ง!